月桂酸致大鼠閉塞性脈管炎動物模型

(1)復制方法  體重為280～320g雄性Wistar大鼠，按35mg/kg體重的劑量腹腔注射3％的戊丨巴丨比妥丨鈉麻醉。動物仰臥固定分離右股動脈，并用動脈夾于股動脈中段阻斷血液。然后注入月桂酸，注入的總體積為0.2ml。先在動脈夾的下方1.0cm處近心端方向注入月桂酸，然后再向股動脈遠心端方向注入余下的月桂酸。注入的標準為血管明顯充盈，略顯白色而無明顯腫脹時，注入結束時注射器的取出動作要輕柔。注入月桂酸15min后打開動脈夾，復通血流，并觀察出血和止血情況。待動物止血、手術側肢體出現(xiàn)明顯改變后可將各層組織逐層縫合。大鼠股動脈注入月桂酸后約5min，患側足爪部皮膚溫度降低，皮膚顏色變蒼白繼而變青紫，動脈搏動減弱或消失，次日受累的足跖變黑，并逐漸向上發(fā)展，形成壞疽和木乃伊化。少數(shù)動物術后表現(xiàn)為患肢水腫，糜爛及炎癥反應。大鼠手術后均有患肢疼痛、跛行和曳行現(xiàn)象，2周內大鼠出現(xiàn)患肢壞疽部分脫落，脫落率為90％。病理檢查發(fā)現(xiàn)，大鼠患肢動脈內均有不同程度的血栓形成，動脈內皮出現(xiàn)不同程度的增生，中膜與外膜還出現(xiàn)了明顯的炎細胞浸潤。該模型的評價分為整體評價以及病理學評價：整體評價主要對患肢腫脹程度、壞疽和木乃伊化病變程度以及范圍進行分級評定(0級：正常；1級：病變局限于趾甲部；2級：病變局限于趾部；3級：病變局限于足爪部；4級：病變局限于膝關節(jié)以下；5級：病變局限于膝關節(jié)以上)；在病理評價方面，將模型致殘大鼠整個右下肢取下后用10％的甲醛固定，3d后再用10％的硝酸脫鈣。將足趾、踝關節(jié)上、下及股部4個部位進行橫斷切片，HE染色，每個標本分別取4張四部位切片放在一個病理切片上，然后在顯微鏡下對動脈血栓情況進行分級(0級：無血栓；1級：1個血栓；2級：2～3個血栓；4級：4個以上血栓)，同時分別對動脈壁炎性細胞浸潤、纖維增生及血栓肌化與再通等情況進行觀察。

(2)模型特點  本模型通過動脈內直接注射月桂酸造模，因此模型的成功率較高，方法簡單，重復性和穩(wěn)定性都很好，試劑價廉易得，尤其是通過這種多部位、半定量的統(tǒng)計學檢查，提高了實驗數(shù)據(jù)的科學性，結果可靠。

(3)比較醫(yī)學  本模型與采用ZT醫(yī)用膠造模方法相比，造模后術區(qū)感染率低，切口延期愈合率低，避免了ZT膠這種異體抗原本身的刺激反應及其所引起的各種異體抗原炎性反應直接造成的對股動脈的壓迫。此模型復制的動物，符合人體TAO病理狀態(tài)下的血管閉塞機理，其癥狀、體征及病理組織學改變與臨床TA0患者的改變基本吻合。