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微量基因組DNA提取試劑盒的實(shí)驗(yàn)步驟

更新時(shí)間:2015-07-22點(diǎn)擊次數(shù):2720
微量基因組DNA提取試劑盒的實(shí)驗(yàn)步驟
使用微量基因組DNA提取試劑盒前請先在Buffer WB中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶上的標(biāo)簽。
1. 取1-100μl抗凝血液到1.5ml離心管中。
2. 不足100μl的血液樣本加Buffer ST1補(bǔ)足到100μl。
3. 加入10μl Foregene Protease,渦旋混勻。
4. 加入100μl Buffer ST2,輕輕顛倒混勻,簡短離心以去除管蓋及內(nèi)壁的液滴。
5. 將離心管放置于65℃金屬浴或水浴中10min,每間隔3min輕搖混勻一次。
6. 將混合液全部轉(zhuǎn)移至離心柱中,12,000rpm(~13,400×g) 離心1min,棄掉收集管中的廢液。
7. 將離心柱放回收集管中,向離心柱中加入500μl Buffer PW,12,000rpm(~13,400×g)離心1min,棄掉收集管中的廢液。
8. 將離心柱放回收集管中,向離心柱中加入700μl Buffer WB,12,000rpm(~13,400×g)離心1min,棄掉收集管中的廢液。
9. 重復(fù)步驟8一次。
10. 將離心柱放回收集管中,12,000rpm(~13,400×g) 空管離心1min。
11. 將離心柱轉(zhuǎn)移至新的1.5ml 離心管中,向膜中央懸空滴加15-100μl 已于65℃預(yù)熱的Buffer EB,室溫放置5min,12,000rpm(~13,400×g) 離心1min。
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